让繁育快快快的秘方!

2018-04-16 08:37 来源:丁香园 作者:
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让繁育快快快的秘方!

你有没有遇到过这样的烦恼:

好不容易拿到两只基因敲除小鼠,可伺候了好久,每到要做实验的时候都觉得小鼠数量捉襟见肘。真是鼠到用时方恨少!

其实,除了常规的合笼交配这种自然繁育以外,还有一种更高效的快速繁育,能快速获得数量可观的不同基因型的同龄小鼠哦。

什么是快速繁育?

我们说的快速繁育就是指使用极少数的雄鼠来获得大量同一周龄子代小鼠。

快速繁育的原理是什么?

其实快速繁育的核心就是体外受精(IVF, in vitro fertilization)—— 采用体外培养的方式,将激活后的精子与卵母细胞进行体外受精并移植入假孕母鼠体内,获得子代小鼠。

IVF 的优势

用四个字来形容,那就是:多     快     好     省


  • 在相同的时间里,利用相同数量的父代小鼠,通过 IVF 方法可以获得更多的子代小鼠。

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  • 大大节约繁育周期,一般自然繁育一代的周期为 3 个月,而 IVF 仅需 1.5 个月!

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  • 同批获得的子代小鼠周龄差异不会超过 7 天,降低了由于小鼠周龄差异导致的实验误差,实验数据更可靠。

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  • 只需要 2 只雄鼠,就可以获得足够数量的子代。

  • 省时省力,解放人力,节约了大量的繁育时间同时也优化了繁育方式。

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哎唷,看上去很厉害的样子!

快速繁育到底有多快,让数字说话~

图表 1. 快速繁育 vs 常规繁育 周期对比

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注:同时获得的小鼠周龄差距在一周之内

IVF Protocol

第一步

培养皿准备

HTF:在 35 mm 皿中做 200ul 的 HTF 微滴 2 个,上覆矿物油。

第二步

精子的采集

(1)将符合要求的性成熟(8 周以上)的雄鼠颈椎脱臼处死,取出附睾上体尾部,去除脂肪与血迹后,置于 HTF 液内。

(2)利用眼科剪在液滴内横断附睾尾,当精子充分游离出附睾尾后,将组织从液滴内取出,将培养皿置于培养箱。

第三步

卵母细胞的收集

处死超排后的雌鼠,取出两侧的输卵管,用显微镊将卵母细胞团拨到受精滴中。

第四步

精卵混合

用 10ul 移液器从精子滴吸取精子,加到卵子滴中,根据卵团大小情况以及精子的活力每滴加 8ul 左右的精子。将精卵混合后,把培养皿置于培养箱中培养。

除了快速繁育,我们还提供小鼠净化及保种服务哦~

净化服务

由于各种原因,小鼠可能被病原感染,并传播感染其他品系的小鼠,从而危及感染小鼠的健康,混淆研究成果。我们的净化服务将为您解除这种烦恼,提供符合 SPF 级要求的小鼠。您只需提供雄鼠,与超排后的雌鼠进行交配,48 小时左右取出 2-cell 的受精卵移植入 SPF 级受体体内,出生小鼠进行基因型鉴定。

胚胎保种服务

将指定品系的基因工程小鼠与超排的雌鼠交配,取 2-cell 期胚胎,并采用程序降温的方法进行胚胎冻存,保存在液氮中。

胚胎复苏服务

冷冻保存的胚胎经复苏后移植到假孕母鼠体内(输卵管移植或子宫移植),受体鼠及新生鼠均维持在 SPF 级小鼠饲养环境中,进行仔鼠出生记录及基因型鉴定等。

文章来源南模生物,更多技术资料详见:http://c.biomart.cn/modelorg/animal

编辑: 高薇

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